Aktivitas Antimikroba Beberapa Tanaman Obat Terhadap Bakteri

Aktivitas Antimikroba Beberapa Tanaman Obat Terhadap Bakteri – Munculnya dan penyebaran resistensi antibiotik, serta evolusi strain baru agen penyebab penyakit, menjadi perhatian besar bagi komunitas kesehatan global.

Aktivitas Antimikroba Beberapa Tanaman Obat Terhadap Bakteri

agion-tech – Pengobatan yang efektif dari suatu penyakit memerlukan pengembangan obat-obatan baru atau beberapa sumber potensial obat baru. Tanaman obat yang umum digunakan masyarakat kita bisa menjadi sumber obat yang sangat baik untuk melawan masalah ini.

Dikutip dari hindawi, Penelitian ini difokuskan untuk mengeksplorasi sifat antimikroba dari tanaman yang biasa digunakan sebagai obat tradisional. Potensi antimikroba dari empat ekstrak tumbuhan yang berbeda disaring terhadap dua belas mikroorganisme patogen dan dua strain bakteri referensi. Ekstrak metanol Oxalis corniculata , Artemisia vulgaris , Cinnamomum tamala, dan Ageratina adenophora diuji sifat antimikrobanya dengan metode difusi sumur agar.

Hasilnya menunjukkan bahwa sebagian besar ekstrak menunjukkan sifat antimikroba. Potensi tertinggi diamati pada ekstrak O. corniculata terhadap Escherichia coli, Salmonella Typhi, MDR Salmonella Typhi, Klebsiella pneumoniae, dan Citrobacter koseri dengan zona hambat (ZOI) 17 mm, 13 mm, 16 mm, 11 mm, dan 12mm, masing-masing. Oxalis corniculata juga menunjukkan KHM tertinggi terhadap organisme uji.

Ekstrak metanol Artemisia vulgaris , Cinnamomum tamala, danAgeratina adenophora menunjukkan efikasi terhadap Staphylococcus aureus. Ageratina adenophora juga menunjukkan aktivitas antijamur terhadap Rhizopus spp. Eksperimen tersebut mengkonfirmasi kemanjuran beberapa ekstrak tumbuhan terpilih sebagai antimikroba alami dan menyarankan kemungkinan menggunakannya dalam obat-obatan untuk pengobatan penyakit menular yang disebabkan oleh organisme uji.

Agen antimikroba pada dasarnya penting dalam mengurangi beban global penyakit menular. Namun, kemunculan dan penyebaran strain multidrug resistant (MDR) pada bakteri patogen telah menjadi ancaman kesehatan masyarakat yang signifikan karena lebih sedikit, atau bahkan terkadang tidak ada, agen antimikroba efektif yang tersedia untuk infeksi yang disebabkan oleh bakteri patogen.

Dengan demikian, mengingat bukti penyebaran global yang cepat dari isolat klinis resisten, kebutuhan untuk menemukan agen antimikroba baru menjadi sangat penting. Namun, catatan masa lalu tentang munculnya resistensi yang cepat dan meluas terhadap agen antimikroba yang baru diperkenalkan menunjukkan bahwa bahkan keluarga baru agen antimikroba akan memiliki harapan hidup yang pendek.

Sejumlah besar tanaman obat telah diakui sebagai sumber berharga senyawa antimikroba alami sebagai alternatif yang berpotensi efektif dalam pengobatan infeksi bakteri bermasalah ini. Menurut Organisasi Kesehatan Dunia (WHO), tanaman obat akan menjadi sumber terbaik untuk mendapatkan berbagai obat.

Banyak tanaman telah digunakan karena sifat antimikrobanya, yang disebabkan oleh fitokimia yang disintesis dalam metabolisme sekunder tanaman. Tanaman kaya akan berbagai macam metabolit sekunder seperti tanin, alkaloid, senyawa fenolik, dan flavonoid, yang telah ditemukan secara in vitro memiliki sifat antimikroba. Sejumlah manual fitoterapi telah menyebutkan berbagai tanaman obat untuk mengobati penyakit menular seperti infeksi saluran kemih, gangguan pencernaan, penyakit pernapasan, dan infeksi kulit.

Penduduk asli Nepal telah menggunakan banyak spesies tanaman sebagai obat tradisional sejak lama, termasuk pengobatan penyakit menular, tetapi data tentang kemanjuran in vivo dan in vitro mereka masih terbatas.

Mempertimbangkan potensi besar tanaman sebagai sumber obat antimikroba, penelitian ini bertujuan untuk menyelidiki aktivitas antibakteri dan antijamur in vitro dari beberapa tanaman obat terpilih dari Nepal terhadap patogen mikroba yang paling umum termasuk bakteri MDR.

Bahan-bahan dan metode-metode

1. Koleksi Sampel

Empat bahan tanaman dikumpulkan berdasarkan sejarah pengobatan tradisional dari pasar lokal Kathmandu. Tabel 1 menunjukkan nama botani, famili, bagian yang digunakan, dan penggunaan etnomedisinal tanaman dalam penelitian ini.

2. Persiapan Ekstrak Tumbuhan

Sampel yang dikumpulkan pertama-tama dicuci di bawah air keran yang mengalir dan dikeringkan di tempat teduh pada suhu kamar selama sebulan. Menggunakan penggiling rumah, bagian tanaman kemudian digiling menjadi bubuk halus. Ditimbang berat serbuk yang digiling dan ekstrak dari masing-masing tanaman dibuat dengan metode perkolasi dingin.

Serbuk halus 60 gram dari masing-masing tanaman ini dilarutkan dalam 160 ml metanol absolut pada suhu kamar selama tiga hari berturut-turut. Supernatan disaring melalui kertas saring Whatman sedangkan residunya digunakan untuk ekstraksi kedua dan ketiga. Setiap hari bagian yang terlarut disaring dan disimpan dalam botol kaca. Setelah ekstraksi ketiga, filtrat kemudian diuapkan di bawah tekanan tereduksi pada 50 ° C menggunakan rotary evaporator untuk menghasilkan ekstrak kasar.

3. Kultur Mikroba

Sebanyak 12 strain mikroba patogen manusia digunakan dalam penelitian ini: S. aureus , MRSA dan E. coli , Salmonella Typhi ( S. Typhi ), MDR S. Typhi , P. aeruginosa , MDR K. pneumoniae , Citrobacter koseri ( C koseri ), kapang Rhizopus spp, Aspergillus niger ( A. niger ), Aspergillus flavus ( A. flavus ) , ragi Candida albicans ( C. albicans ), dan strain referensi E. coli ATCC 25922 dan S. aureusATCC 25923. Serangkaian uji morfologi, fisiologis, dan biokimia konvensional dilakukan untuk mengidentifikasi mikroorganisme yang dipilih.

Jamur diidentifikasi setelah pertumbuhan pada media yang sesuai dan karakteristik morfologi dan mikroskopis. Uji kepekaan antimikroba dilakukan untuk semua isolat mikroba dengan metode difusi cakram Kirby Bauer yang dimodifikasi mengikuti pedoman Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Isolat multidrug resistant (MDR) didefinisikan sebagai isolat yang resisten terhadap tiga kelas antibiotik.

4. Uji Antimikroba Ekstrak Tumbuhan

Uji antimikroba dari ekstrak tanaman yang berbeda dilakukan dengan metode difusi sumur agar di pelat Mueller Hinton Agar (MHA). Organisme uji diinokulasi dalam kaldu Nutrien dan diinkubasi semalaman pada suhu 37°C untuk menyesuaikan kekeruhan hingga 0,5 standar McFarland memberikan inokulum akhir 1,5 × 108 CFU/ml. Pelat MHA dikultur rumput dengan kaldu kultur mikroba standar. Ekstrak tumbuhan konsentrasi 50 mg/ml disiapkan dalam Dimetil Sulfoksida (DMSO). Enam sumur 6 mm dibor di media yang diinokulasi dengan bantuan penggerek gabus steril (6 mm).

Setiap baik diisi dengan 50 µl ekstrak dari tanaman yang berbeda: kontrol positif (amikasin 30 mcg dan nitrofurantoin 300 mcg) untuk bakteri dan 1 mg/ml sikloheksilamin untuk isolat jamur dan kontrol negatif/pelarut (DMSO), masing-masing. Itu dibiarkan berdifusi selama sekitar 30 menit pada suhu kamar dan diinkubasi selama 18-24 jam pada 37 ° C. Setelah inkubasi, pelat diamati untuk pembentukan zona bening di sekitar sumur yang sesuai dengan aktivitas antimikroba dari senyawa yang diuji. Zona hambat (ZOI) diamati dan diukur dalam mm.

5. Penentuan KHM dan MBC Ekstrak Tumbuhan

Metode mikrodilusi kaldu digunakan untuk menentukan MIC menurut CLSI. Pengenceran seri dua kali lipat dari ekstrak disiapkan langsung di piring mikrotiter yang mengandung kaldu Mueller Hinton untuk mendapatkan berbagai konsentrasi. Inokulum bakteri ditambahkan untuk memberikan konsentrasi akhir 5 × 10 5 CFU / mL dalam setiap sumur. Kontrol positif yang digunakan mengandung amikasin sebagai obat standar.

Plate ditutup dengan sealer steril dan diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37°C. Resazurin ditambahkan di setiap sumur pelat mikrotiter dan diinkubasi pada suhu 37°C selama 30 menit. Sumur yang berisi pertumbuhan bakteri berubah menjadi warna merah muda sedangkan sumur tanpa pertumbuhan bakteri tetap berwarna biru. MIC dianggap sebagai konsentrasi terendah ekstrak yang benar-benar menghambat pertumbuhan bakteri.

Hasil Ekstraksi Ekstrak Tumbuhan

Dengan menggunakan metode perkolasi dingin, rendemen tertinggi diperoleh dari ekstrak C. tamala sebesar 9,35% sedangkan rendemen terendah adalah A. adenophora.

Evaluasi aktivitas antimikroba dari empat ekstrak tumbuhan yang berbeda ditentukan awalnya dengan metode difusi cakram terhadap mikroorganisme yang berbeda. Organisme ini sering dijumpai pada penyakit infeksi. Studi tersebut menunjukkan bahwa semua ekstrak tumbuhan yang digunakan dalam studi menunjukkan berbagai tingkat aktivitas antimikroba terhadap semua mikroorganisme yang diuji.

Diamati bahwa O. corniculata adalah yang paling efektif di antara empat ekstrak tumbuhan yang diuji. Hal ini menunjukkan zona hambat (ZOI) terhadap semua bakteri gram negatif yang diuji sedangkan tidak ada aktivitas terhadap bakteri gram positif dan jamur. A. adenophora ditemukan efektif melawan bakteri gram positif dan gram negatif. Ekstrak dari A. adenophora menunjukkan ZOI terhadap S. aureus serta S. Typhi.

Hal ini juga menunjukkan aktivitas antijamur terhadap Rhizopus spp. C. tamala dan A. vulgaris hanya menunjukkan aktivitas antibakteri terhadap bakteri gram positif. Aktivitas antijamur hanya ditunjukkan oleh A. adenophoraterhadap Rhizopus spp. Tak satu pun dari ekstrak tumbuhan lain menunjukkan aktivitas antijamur.

Efektivitas ekstrak dalam strain bakteri yang diuji ditentukan dengan mengukur konsentrasi hambat minimum (KHM). MIC dilakukan hanya untuk organisme yang menunjukkan zona inhibisi dan sensitif terhadap ekstrak tumbuhan dalam uji antimikroba sebelumnya dengan metode difusi sumur agar.

Di antara semua ekstrak tumbuhan yang diuji, O. corniculata ditemukan menunjukkan aktivitas antimikroba yang kuat. MIC dari S. Typhi adalah 100mg/ml dan MDR S. Typhi adalah 50 mg/ml terhadap O. corniculata . Demikian pula, bakteri gram negatif lainnya ( E. coli, K. pneumoniae , dan MDR C. koseri ) ditemukan 25 mg/ml (Tabel 3). Ekstrak tumbuhan lain hanya efektif terhadap S. aureus dengan nilai KHM 12,5 mg/ml.

Kesimpulan

Dalam penelitian ini, aktivitas antimikroba dari empat tanaman obat tradisional dari Nepal dinilai dengan metode perkolasi dingin. Hasil penelitian menunjukkan potensi efek antibakteri ekstrak O. corniculata terhadap strain bakteri yang diuji, sedangkan C. tamala, A. adenophora, dan A. vulgaris hanya efektif terhadap S. aureus. Ekstrak A. adenophora juga menunjukkan aktivitas antijamur.

Meskipun kami menunjukkan aktivitas in vitro yang kuat dari beberapa ekstrak tumbuhan tradisional untuk bakteri tertentu, itu mungkin tidak diterjemahkan secara in vivo. Alih-alih metode perkolasi dingin, ekstraksi soxhlet, subfraksi, senyawa semi murni, atau senyawa murni yang diisolasi dari tanaman ini mungkin menunjukkan aktivitas antibakteri yang lebih baik.

Penyelidikan lebih lanjut diperlukan untuk mengevaluasi aktivitas antimikobakteri, antivirus, dan antiparasit. Selain itu, bagian lain dari tanaman perlu dipelajari untuk mengevaluasi ekstrak tanaman yang dipelajari sebagai agen antimikroba yang potensial.

Related Posts